本视频为使用FluidicLab微滴/微球制备仪制备海藻酸钠微球（乙酸固化法）实验视频教程

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操作参考:

1.试剂配制
(1)、2 M CaCl2溶液配制:
称量约2.21gCaCl2,，加入超纯水振荡溶解，*终定容至10mL备用。

(2)、2%海藻酸钠溶液配制:
称量海藻酸钠粉末约0.29，加入到9.8g超纯水中振荡，放置于60℃鼓风干燥箱中辅助溶解，*终配制得到质量分数为2%的海藻酸钠溶液备用。

(3)、2 M NaOH溶液配制:
称量块状NaOH约1.6克，加入超纯水振荡溶解，*终定容至20mL备用。

(4)、240 mM Ca-EDTA溶液配制(pH=7.2):
取1.2 ml的2 M CaCl2溶液与4.8 mL 的0.5 M EDTA振荡均匀，随后加入2 M NaOH调整pH至7.2左右，*终加入超纯水定容至10 mL。

(5)、水相1配制(1%海藻酸钠，120 mM Ca-EDTA):
取等体积240 mM Ca-EDTA溶液与2%海藻酸钠溶液振荡均匀，用0.22um针式过滤器过滤备用。

2.海藻酸钠微滴制备和固化
- 连接微滴生成仪管路(详见《微滴制备仪使用手册》);
- 在通道一中的储液池中加入5 mL微滴生成油;将水相(1%海藻酸钠，120 mM Ca-EDTA)装入通道二中的储液池中;打开空气压缩机及气源处理开关;
- 在电脑端设置通道一(油相)、通道二(水相)压力排出管路及芯片中的空气;
- 待空气排出(管路及芯片充满液体)后，设定油相、水相流速分别为7和5 uL/min;
-按《微滴生成仪使用手册》调整流速增加反馈值(Feedback)以快速达到预定设置值;
-待微液滴生成稳定后，用培养皿接收液滴用并显微镜观察其均匀性;微液滴稳定生成后，即可开始接收至1%乙酸的油相离心管中;
-20 min后停止收集，开始静置约30 min固化。

3.海藻酸钠微球破乳清洗
- 取出底部微滴生成油;
- 按V球:V破=1:2 加入破乳剂，振荡破乳；
- 1000 rpm，30s离心处理并取出底部破乳剂(后续可重复操作1-2次);
- *终分散于PBS缓冲液中(可多重复洗几次);
- 在显微镜下观察固化后海藻酸钠凝胶微球(92.91um，2.35%)。