本视频为使用FluidicLab微滴/微球制备仪制备PLGA微球实验视频教程
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实验所使用设备:
微滴制备仪(FluidicLab)、离心机(湘仪)、普通光学显微镜电脑(win10以上系统)、磁力搅拌水浴锅。
实验所需试剂:
PLGA粉末(FluidicLab,50/50,Mw: 2 w)、二氯甲烷(Greagent)、聚乙烯醇(Sigma-Aldrich,P8136-250g)
操作步骤参考:(内容仅供学习参考,具体操作以上方视频为准)
1.试剂配制
(1)2% 聚乙烯醇(PVA)水溶液配制:
称取0.2gPVA粉末,加入9.8g超纯水,放入85°C水浴锅中搅拌加热溶解。用0.22 umPTFE针式过滤器过滤处理。
(2)5% PLGA-二氯甲烷溶液配制
称取0.1gPLGA粉末,加入1.9 g(1.43 mL)二氯甲烷,超声振荡溶解。用0.22 umPTFE针式过滤器过滤处理。
2.PLGA微滴制备和固化:
连接微滴生成仪管路(详见《微滴制备仪使用手册》);
取5 mL2% PVA水溶液,加入通道一储液池;
取1 mL5% PLGA-二氯甲烷溶液,加入通道二储液池(黑色离心管);
打开空气压缩机及气源处理开关;
在电脑端设置通道一(水相)、通道二(水相)压力排出管路及芯片中的空气;
待空气排出(管路及芯片充满液体)后,分别设定水相、油相流速为14 uL/min和3 uL/min;
按《微滴制备仪使用手册》调整流速增加反馈值(Feedback)以快速达到预定设置值;
微液滴稳定生成后,即可开始接收至2%PVA的玻璃培养皿中;
60 min后停止收集,放置于通风橱中室温挥发溶剂固化。
3.PLGA微球固化后处理:
将微球转移至离心管,离心取出上部溶液;
按V球:V水=1:4加入超纯水,振荡;
1000rpm,30s离心处理并取出上部溶液(后续可重复操作1-2次);
在显微镜下观察固化后PLGA微球(25.58 um,1.99%)。