DTT溶解聚丙烯酰胺水凝胶微球制备

基于微液滴的单细胞测序方以其*高通量和单细胞的分辨率引发了生物学的一次革命。在微流控单细胞测序技术中，barcode gel beads是其技术的核心。目前常见的用于高通量单细胞测序的barcode gel beads均为聚丙烯酰胺水凝胶微球。

该微球通过二硫键交联形成高分子骨架，在交联体系中存在5’-Acrydite修饰的引物时，引物可以共价结合在微球骨架上，并伴随微球和单细胞包裹在单个微滴中。微球骨架在DTT（二硫苏糖醇）存在时快速发生降解，将微球上交联的引物释放到液滴中，在细胞裂解后和mRNA结合，完成反转录和扩增。

常规兼容10X Genomics体系的微球直径为50-53微米。

图一、固化后的聚丙烯酰胺水凝胶微球

图二 聚丙烯酰胺水凝胶微球粒径分布。

左：10X barcode gel beads粒径分布 ；  右：FluidicLab微球粒径分布